„całkowita ekstrakcja rna”
Opis zestawu:
Nie musisz się martwić o degradację RNA.Cały system jest wolny od RNaz
Skutecznie usuwaj DNA za pomocą DNA-Cleaning Column
Usuń DNA bez dodawania DNazy
Proste — wszystkie operacje są wykonywane w temperaturze pokojowej
Szybko — operacja może zostać zakończona w ciągu 30 minut
Bezpieczny — nie stosuje się żadnych odczynników organicznych
Wysoka czystość — OD260/280≈1,8-2,1
Trzymając się idei „Tworzenia produktów najwyższej jakości i tworzenia przyjaciół z ludźmi z całego świata”, nieustannie pragniemy, aby kupujący zaczynali od „całkowitej ekstrakcji rna”. Jesteśmy gotowi współpracować z przyjaciółmi biznesowymi z kraju i zagranicy i razem tworzyć wspaniałą przyszłość.
Trzymając się postrzegania „Tworzenia produktów najwyższej jakości i tworzenia przyjaźni z ludźmi z całego świata”, nieustannie stawiamy pragnienie kupujących na początek dlaCałkowita ekstrakcja Rna, Ze względu na dobrą jakość i rozsądne ceny, nasze produkty zostały wywiezione do ponad 10 krajów i regionów.Zapraszamy do współpracy wszystkich klientów z kraju i zagranicy.Co więcej, zadowolenie klienta jest naszym wiecznym dążeniem.
Opisy zestawów
50 przygotowań, 200 przygotowań
Ten zestaw wykorzystuje kolumnę wirówkową i formułę opracowaną przez naszą firmę, która może z dużą wydajnością ekstrahować całkowity RNA o wysokiej czystości i wysokiej jakości z różnych tkanek zwierzęcych. Zapewnia wydajną kolumnę czyszczącą DNA, która może łatwo oddzielić i zaadsorbować genomowy DNA z supernatantu i lizatu tkankowego, w prosty i oszczędzający czas;Kolumna tylko z RNA może skutecznie wiązać RNA i może być przetwarzana jednocześnie dzięki unikalnej formule Wiele próbek.
Cały system jest wolny od RNaz, dzięki czemu wyekstrahowany RNA nie ulega degradacji;Buffer RW1, Buffer RW2 system płukania bufora, dzięki czemu otrzymany RNA jest wolny od zanieczyszczeń białkowych, DNA, jonowych i związków organicznych.
Elementy zestawu:
| Bufor RL1 , Bufor RL2 |
| Bufor RW1, Bufor RW2 |
| Wolna od RNazy ddH2O, kolumna czyszcząca DNA |
| Kolumna tylko z RNA |
Funkcje i zalety
■ Nie trzeba się martwić o degradację RNA;cały system jest wolny od RNaz
■ Skutecznie usuwaj DNA za pomocą DNA-Cleaning Column
■ Usuń DNA bez dodawania DNazy
■ Proste — wszystkie operacje są wykonywane w temperaturze pokojowej
■ Szybka — operacja może zostać zakończona w ciągu 30 minut
■ Bezpieczny — nie wymaga odczynnika organicznego
■ Wysoka czystość -OD260/280≈1,8-2,1
Aplikacja zestawu
Nadaje się do ekstrakcji i oczyszczania całkowitego RNA z różnych świeżych lub mrożonych tkanek zwierzęcych lub hodowanych komórek.
Parametry produktu
■ Dalsze zastosowania: synteza pierwszej nici cDNA, RT-PCR, klonowanie molekularne, Northern Blot itp.
■ Próbki: tkanki zwierzęce, hodowane komórki
■ Dawkowanie: Tkanki 10-20mg, Komórki(2-5)×106
■ Maksymalna zdolność wiązania DNA przez kolumnę oczyszczającą: 80 μg
■ Objętość elucji: 50-200 μl
Przepływ pracy
Diagram
Zestaw do izolacji całkowitego RNA zwierząt leczonych 20 mg
Świeże próbki myszy, weź 5% oczyszczonego całkowitego RNA 1% agaru
Elektroforeza glikożelowa
1: Śledziona 2: Nerka
3: Wątroba 4: Serce
Przechowywanie i trwałość
Zestaw można przechowywać przez 24 miesiące w temperaturze pokojowej (15–25 ℃) lub 2–8 ℃ przez dłuższy czas.Bufor RL1 można przechowywać w temperaturze 4 ℃ przez 1 miesiąc po dodaniu β-merkaptoetanolu (opcjonalnie). Trzymając się postrzegania „Tworzenia produktów najwyższej jakości i tworzenia przyjaciół z ludźmi dzisiaj z całego świata”, nieustannie pragniemy, aby kupujący zaczynali od odnawialnego projektu dla chińskiego dostawcy chemikaliów organicznych Alkohol izopropylowy CAS 67-63-0 z dobrą ceną, Jesteśmy gotowi współpracować z przyjaciółmi biznesowymi z kraju i zagranicy i wspólnie tworzyć wspaniałą przyszłość.
Odnawialny projekt dla Chin Alkohol izopropylowy, dostawca alkoholu izopropylowego, Ze względu na dobrą jakość i rozsądne ceny nasze produkty zostały wyeksportowane do ponad 10 krajów i regionów.Zapraszamy do współpracy wszystkich klientów z kraju i zagranicy.Co więcej, zadowolenie klienta jest naszym wiecznym dążeniem.
RNA nie jest ekstrahowany lub wydajność RNA jest niska
Często istnieje wiele czynników, które wpływają na wydajność odzyskiwania, takich jak: zawartość RNA w próbce tkanki, metoda działania, objętość elucji itp.
1. Podczas pracy wykonano łaźnię lodową lub wirowanie kriogeniczne (4°C).
Zalecenia: Przez cały proces pracować w temperaturze pokojowej (15-25°C), nie stosować kąpieli lodowej i wirować w niskich temperaturach.
2. Niewłaściwa konserwacja próbki lub zbyt długi czas jej przechowywania.
Zalecenie: Przechowywać próbki w temperaturze -80°C lub zamrozić w ciekłym azocie i unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania;spróbuj użyć świeżej tkanki lub hodowanych komórek do ekstrakcji RNA.
3. Niewystarczająca liza próbki.
Zalecenie: Podczas homogenizacji tkanki należy upewnić się, że tkanka jest wystarczająco zhomogenizowana i że komórki tkanki są wystarczająco podzielone, aby wyjaśnić uwalnianie RNA.
4. Eluent nie jest dodany prawidłowo.
Zalecenie: Potwierdź, że ddH jest wolne od RNaz2O wkrapla się na środek membrany kolumny oczyszczającej.
5. Do buforu Buffer RL2 lub Buffer RW2 nie dodano właściwej objętości etanolu absolutnego.
Zalecenie: Postępuj zgodnie z instrukcjami, dodaj odpowiednią objętość etanolu absolutnego do Buffer RL2 i Buffer RW2 i dobrze wymieszaj przed użyciem zestawu.
6. Dawka próbki tkanki nie jest odpowiednia.
Zalecenie: Użyj 10-20 mg tkanki lub (1-5) × 106komórek na 500 μl buforu RL1, ponieważ nadmierne użycie tkanki może skutkować zmniejszoną ekstrakcją RNA.
7. Niewłaściwa objętość elucji lub niepełna elucja.
Zalecenie: Objętość elucji kolumny oczyszczającej wynosi 50-200 μl;jeśli efekt elucji nie jest zadowalający, zaleca się wydłużenie czasu umieszczenia w temperaturze pokojowej po dodaniu podgrzanego RNazy-Free ddH2O, np. przez 5-10 min.
8. Kolumna oczyszczająca zawiera pozostałości etanolu po przemyciu buforem Buffer RW2.
Zalecenie: Jeśli po przemyciu buforem Buffer RW2 pozostanie etanol, wirowanie z pustą probówką przez 1 min., czas operacji wirowania z pustą probówką można wydłużyć do 2 min lub umieścić kolumnę oczyszczającą w temperaturze pokojowej na 5 min w celu odpowiedniego usunięcia resztek etanolu.
Oczyszczony RNA ulega degradacji
Jakość oczyszczonego RNA jest związana z takimi czynnikami, jak konserwacja próbki, zanieczyszczenie RNazą, manipulacja itp.
1. Próbki tkanek nie są przechowywane na czas.
Zalecenie: Jeśli próbki tkanki lub komórki nie zostaną użyte w odpowiednim czasie po pobraniu, należy natychmiast poddać kriokonserwacji w temperaturze -80°C lub w ciekłym azocie.Aby wyekstrahować RNA, w miarę możliwości używaj świeżo pobranej próbki tkanki lub komórki.
2. Wielokrotne zamrażanie i rozmrażanie próbek tkanek.
Zalecenie: Podczas przechowywania próbek tkanek najlepiej jest pociąć je na małe kawałki w celu konserwacji i usunąć jeden z nich podczas ich używania, aby uniknąć wielokrotnego zamrażania-rozmrażania próbki i degradacji RNA.
3. RNaza jest wprowadzana lub nie ma na sobie rękawiczek jednorazowych, maseczek itp. podczas zabiegu.
Zalecenie: Eksperymenty z ekstrakcją RNA najlepiej przeprowadzać w oddzielnych pomieszczeniach do manipulacji RNA, a stół jest czyszczony przed eksperymentem.
Podczas eksperymentu należy nosić jednorazowe rękawiczki i maski, aby zminimalizować degradację RNA spowodowaną wprowadzeniem RNazy.
4. Odczynniki są zanieczyszczone RNazą podczas użytkowania.
Zalecenie: Wymień na nowy zestaw do izolacji całkowitego RNA zwierząt do podobnych eksperymentów.
5. Probówki wirówkowe, końcówki itp. używane do manipulacji RNA są zanieczyszczone RNazą.
Zalecenie: Potwierdź, że wszystkie probówki wirówkowe, końcówki, pipety itp. używane do ekstrakcji RNA są wolne od RNaz.
Oczyszczony uzyskany RNA wpływa na dalsze eksperymenty
RNA oczyszczony przez kolumnę oczyszczającą, jeśli jony soli, zawartość białka jest zbyt duża, wpłynie to na dalszy eksperyment, taki jak: odwrotna transkrypcja,Northern Blot et al.
1. Eluowany RNA zawiera reszty jonów soli.
Zalecenie: Potwierdź, że do buforu Buffer RW2 dodano odpowiednią objętość etanolu i wykonaj 2 przemywania kolumny oczyszczającej przy prędkości wirowania wskazanej do działania;jeśli są jakiekolwiek pozostałości jonów soli, pozostaw kolumnę oczyszczającą w Buffer RW2 na 5 min w temperaturze pokojowej i wykonaj wirowanie, aby zmaksymalizować usunięcie zanieczyszczeń solnych.
2. Pozostałość etanolu w eluowanym RNA.
Zalecenie: Potwierdź, że po przemyciu buforem RW2 wykonaj operację wirowania pustych probówek przy prędkości wirowania wskazanej dla tej operacji, zwiększ czas operacji wirowania pustych probówek do 2 min, jeśli nadal są pozostałości etanolu, lub pozostaw w temperaturze pokojowej przez 5 minut po wirowaniu pustych probówek, aby zmaksymalizować usunięcie pozostałości etanolu.
