Lnc-RT Heroᵀᴹ I (z gDNase) (Super Premix do syntezy pierwszej nici cDNA z lncRNA)
Specyfikacje
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (z gDNase) to system odwrotnej transkrypcji opracowany specjalnie dla lncRNA w celu szybkiego usuwania zanieczyszczeń genomowym DNA.5×gDNase Mix może szybko usunąć pozostały genom w RNA w temperaturze 42°C przez 2 minuty, skutecznie unikając interferencji genomu z wynikami qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix zawiera Foregene LncRNA Reverse Transcriptase specjalnie opracowaną przez Foregene, która jest nowym typem odwrotnej transkryptazy specjalnie dla lncRNA i innych złożonych matryc długiego RNA, z silniejszym powinowactwem RNA i wyższą wydajnością zapisu odwrotnego.Zoptymalizowany system przyspiesza tempo odwrotnej transkrypcji i może z łatwością transkrybować szablony RNA o wysokiej zawartości GC i złożonej strukturze drugorzędowej.Syntezę pierwszej nici cDNA można zakończyć w temperaturze 42°C w ciągu 15 minut.
Elementy zestawu
| 5× Mieszanka gDNaz |
| 5× Mieszanka L-RT HeroTM |
| ddH2O wolne od RNaz |
| Instrukcje |
Funkcje i zalety
■Skuteczna zdolność do usuwania gDNA, która może usunąć gDNA z szablonu w ciągu 2 minut.
■ Może wydajnie odwrócić transkrypcję lncRNA.Gdy produkt odwrotnej transkrypcji poddaje się qPCR, wartość Ct jest niższa niż w konwencjonalnym systemie odwrotnej transkrypcji.
■ Wydajny system odwrotnej transkrypcji, synteza pierwszej nici cDNA zajmuje tylko 15 minut.
■ Złożone szablony: szablony o dużej zawartości GC i złożonej strukturze drugorzędowej można również odwracać z dużą wydajnością.
■ System odwrotnej transkrypcji o wysokiej czułości, szablony na poziomie pg mogą również uzyskiwać wysokiej jakości cDNA.
■ Układ odwrotnej transkrypcji ma wysoką stabilność termiczną, optymalna temperatura reakcji to 42 st℃i nadal ma dobrą wydajność odwrotnej transkrypcji przy 50℃.
Aplikacja zestawu
Względna analiza ilościowa lncRNA.
Absolutna analiza ilościowa lncRNA.
Może szybko i dokładnie analizować śladowe RNA, takie jak wirus RNA.
Odwrotna transkrypcja matryc RNA o wysokiej zawartości GC lub złożonej strukturze drugorzędowej.
Przepływ pracy
Przechowywanie i trwałość
Zestaw należy przechowywać w temperaturze -20°C. Przechowuj produkt w lodówce o stałej temperaturze w -20°C natychmiast po otrzymaniu.Jeśli warunki przechowywania są odpowiednie, produkt nie pogorszy swoich właściwości podczas 1-rocznego okresu ważności.
Przewodnik po analizie problemu
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-specyficzne wzmocnienie
1. Nierozsądny projekt podkładu
Zalecenie: Podkłady projektować zgodnie z zasadami projektowania podkładów.
2. Pozostałości genomu.
Sugestia: Upewnij się, że pierwszy etap reakcji usuwania gDNA ma temperaturę 42°C, a czas reakcji można również wydłużyć do 5 min.
Brak sygnału amplifikacji w RT-qPCR
1. RNA ulega degradacji.
Zalecenie: Materiał do ekstrakcji RNA powinien być jak najbardziej świeży, a RNA powinno być wysokiej jakości i czystości.
2. RNA zawiera inhibitory.
Zalecenie: Inhibitory odwrotnej transkrypcji obejmują na ogół SDS, sole guanidyny, EDTA itp. Zaleca się przemycie osadu RNA 70% etanolem w celu usunięcia inhibitorów.
3. Kwestie projektowania podkładów.
Zalecenie: Zgodnie z zasadą projektowania podkładów, przeprojektuj podkłady do kontroli.
Pasmo docelowe pojawia się w ślepej próbie kontrolnej
1. Zanieczyszczenie narzędzi roboczych lub odczynników.
Zalecenie: Wszystkie odczynniki lub sprzęt do eksperymentu powinny być sterylizowane w autoklawie.Zachowaj ostrożność i delikatność podczas obsługi, aby zapobiec zassaniu próbek DNA do pipety lub wylaniu się z probówki wirówkowej.
2. Zanieczyszczenie wystąpiło podczas przygotowywania systemu reakcji PCR.
Zalecenia: Podczas obchodzenia się z substancją zachować niezbędne środki ostrożności, takie jak: noszenie rękawiczek lateksowych, używanie końcówek z filtrem.Użyj Real Time PCR Mix w systemie odpornym na zanieczyszczenia.
3. Podkłady ulegają degradacji.
Sugestia: Użyj elektroforezy SDS-PAGE, aby wykryć, czy startery są zdegradowane, i zastąp je nowymi starterami do eksperymentów z wykrywaniem fluorescencji.
Instrukcja obsługi:
Lnc-RT HeroTM I (z gDNazą) (Super Premix do syntezy pierwszej nici cDNA z lncRNA) Instrukcja obsługi
