Zestaw do bezpośredniego RT-qPCR
Opis zestawu:
◮ Zestaw Direct RT-qPCR, wykorzystujący Foreasy Reverse Transcriptase i Foreasy HS Taq DNA Polymerase opracowany przez firmę Foregene, z unikalnym buforem reakcyjnym, sprawia, że zestaw ten charakteryzuje się dużą odpornością i kompatybilnością oraz może bezpośrednio testować reakcję z użyciem systemu Foregene Lysis jako matrycy.Ten zestaw może ubiegać się o opracowanie zestawu do wykrywania kwasu nukleinowego COVID-19 i zestawu do wykrywania kwasu nukleinowego innych bakterii chorobotwórczych.
Opis
Zestaw Direct RT-qPCR zawiera oddzielnie zapakowany bufor RT-qPCR i wysoce wydajny enzymmieszanka (Taq, M-MLV, RI), dzięki czemu jest wygodna do tworzenia zestawów i systemów zapleczaregulacja, w ramach prostej weryfikacji.
Specyfikacje
500 ton, 50 000 ton
Elementy zestawu
| Zawartość zestawu (układ reakcyjny 20 μl) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 ton | 50 000 ton | |
| Bezpośrednia mieszanina enzymów | 500 μl×1 | 50 ml×1 |
| 2× bezpośredni bufor RT-qPCR | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Instrukcja | 1 | 1 |
Kroki operacyjne
Przed przygotowaniem odczynników wszystkie odczynniki w zestawie należy rozmrozić w temperaturze pokojowej i delikatnie wymieszać.
A: Przygotowywać of szablon I odczynnik
1. Przygotuj przygotowaną matrycę RNA (zaleca się użycie zestawu serii Foregene Total RNA Isolation Kit do ekstrakcji i oczyszczenia matrycy RNA) lub próbkę produktu do krakowania (zaleca się użycie systemu Foregene Lysis), specyficzne startery (10 μM) i inne odpowiednie materiały eksploatacyjne, instrument.
2. Umieść 2× Direct RT-qPCR Buffer, ddH2O wolne od RNazy i 20× ROX Reference Dye (jeśli's potrzebne) w pudełku z lodem, aby rozpuściły się naturalnie, i delikatnie wymieszaj.
B: Przygotowywać of RT-qPCR system
Tabela 1 : Przygotowywać of RT-qPCR ssystem
| Część | Tom | Stężenie końcowe |
| 2× bezpośredni bufor RT-qPCR | 10 μl | 1× |
| Bezpośrednia mieszanina enzymów | 1μL | |
| Podkład do przodu (10 μM) | 0,8 μl | 50-900nM |
| Podkład odwrotny (10 μM) | 0,8 μl | 50-900nM |
| Sonda (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Matryca (RNA lub lizat) | X μl | |
| 20 × barwnik referencyjny ROX | - | 1* |
| Wolna od RNazyddH2O | (6,4-X) μl | |
| Maksymalna głośność | 20μL |
C: Ustawić the RT-qPCR reakcja program
Tabela 2 : RT-qPCR reakton program ustawienie (Do przykład: dwa-krok metoda)
| Krok | Temperatura | Czas | Cykle | Treść | |
| 1 | 50 ℃ | 15 minut | 1* | 1 | Transkrypcja odwrotna |
| 2 | 95℃ | 1 minuta | 1 | Predenaturacja | |
| 3 | 95℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturacja | |
| 60℃ | 30 sekund 2* | Wyżarzanie/rozszerzenie | |||
Przechowywanie i trwałość
-Zestaw należy przechowywać w temperaturze -20± 5℃.Okres ważności wynosi 12 miesięcy.
-Unikaj powtarzających się cykli zamrażania i rozmrażania (<5 cykli).
