Zestaw ForeDirect RT-qPCR
Opis zestawu:
◮Do bezpośredniej amplifikacji RNA w czasie rzeczywistym z pobranych wymazów bez procesów oczyszczania RNA.Ten zestaw umożliwia zakończenie cykli qRT-PCR w ciągu jednej godziny.Mieszanka enzymów jest zoptymalizowaną mieszanką odwrotnej transkryptazy, polimerazy DNA Hot-Start Taq, inhibitora RNazy.Reaction Buffer zawiera wszystkie wymagane składniki, w tym zoptymalizowane składniki buforowe, Mg2+, dUTP i dNTP.
Opis
Zestaw ForeDirect RT-qPCR jest przeznaczony do bezpośredniej amplifikacji RNA w czasie rzeczywistym z pobranych wymazów bez procesów oczyszczania RNA.Ten zestaw umożliwia zakończenie cykli qRT-PCR w ciągu jednej godziny.Mieszanka enzymów jest zoptymalizowaną mieszanką odwrotnej transkryptazy, polimerazy DNA Hot-Start Taq, inhibitora RNazy.Reaction Buffer zawiera wszystkie wymagane składniki, w tym zoptymalizowane składniki buforowe, Mg2+, dUTP i dNTP.
Specyfikacje
100T
Elementy zestawu
| Środek uwalniający kwas nukleinowy |
| środek chroniący RNA |
| 2x Bufor RT-qPCR |
| Mieszanina enzymów (Taq&M-MLV) |
| Instrukcje |
Aplikacja PCR
1. Po krótkim odwirowaniu probówek do reakcji PCR umieść je w zbiorniku próbki aparatu do amplifikacji.
2. Protokół termiczny
| Krok | Temperatura | Czas | Cykle | |
| 1 | Transkrypcja odwrotna | 50 ℃ | 15 minut | 1 |
| 2 | Predenaturacja | 95℃ | 1 minuta | 1 |
| 3 | Denaturacja | 95℃ | 10 sekund | 42 |
| 4 | Wyżarzanie/rozszerzenie | 60℃ | 30 sekund | |
Notatka:Sygnał fluorescencyjny wykrywano natychmiast po etapie wydłużania każdego cyklu.
3. Po ustawieniu zapisz plik i uruchom program reakcji.
Kroki operacyjne
Przed przygotowaniem odczynników wszystkie odczynniki w zestawie należy rozmrozić w temperaturze pokojowej i delikatnie wymieszać.
Przygotowanie odczynnika
1. Przygotuj mieszankę uwalniającą kwasy nukleinowe
| Część | Objętość na próbkę lub kontrolę |
| Środek uwalniający kwas nukleinowy | 5 μl |
| środek chroniący RNA | 0,5 μl |
2. Przygotuj mieszaninę reakcyjną
| Część | Objętość na próbkę lub kontrolę |
| 2x Bufor RT-qPCR | 15 μl |
| Mieszanina enzymów (Taq&M-MLV) | 1,5 μl |
| Startery i sondy | 1 μl |
Przechowywanie i trwałość
-Zestaw należy przechowywać w temperaturze -20± 5℃.Okres ważności wynosi 12 miesięcy.
-Unikaj powtarzających się cykli zamrażania i rozmrażania (<5 cykli).
