Zestaw do izolacji RNA krwi
Opisy
Zestaw przyjmuje kolumnę wirówkową i formułę opracowaną przez naszą firmę, która może skutecznie ekstrahować całkowity RNA o wysokiej czystości i wysokiej jakości z antykoagulowanej krwi pełnej.Zestaw zawiera lizat krwinek czerwonych (Buffer RCL), który może szybko i skutecznie lizować krwinki czerwone i zatrzymywać krwinki białe.Wydajna kolumna do czyszczenia DNA może z łatwością oddzielić supernatant i lizaty komórkowe oraz zaadsorbować i usunąć genomowe DNA.Operacja jest prosta i oszczędza czas;Kolumna zawierająca tylko RNA może skutecznie wiązać RNA, a dzięki unikalnej formule może przetwarzać dużą liczbę próbek jednocześnie.
Cały system RNazy-Free sprawia, że wyekstrahowany RNA nie ulega degradacji;System przemywania buforów Buffer RW1 i Buffer RW2 sprawia, że otrzymane RNA jest wolne od zanieczyszczeń białkowych, DNA, jonów i związków organicznych.
Zawartość zestawu
Zestaw do izolacji całkowitego RNA krwi | ||
Skład zestawu | RE-04011 | RE-04013 |
50 razy | 200 razy | |
Bufor RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
Bufor BRL1* | 30ml | 120 ml |
Bufor BRL2 | 18ml | 66 ml |
Bufor RW1* | 25 ml | 100 ml |
Bufor RW2 | 24 ml | 96 ml |
ddH wolne od RNaz2 O | 10 ml | 40ml |
Kolumna zawierająca tylko RNA | 50 zestawów | 200 zestawów |
Kolumna do czyszczenia DNA | 50 zestawów | 200 zestawów |
podręcznik | 1 kopia | 1 kopia |
Funkcje i zalety
-Nie musisz się martwić o degradację RNA.Cały zestaw jest wolny od RNaz.
-Prosty — wszystkie operacje są wykonywane w temperaturze pokojowej.
-Szybki — operacja może zostać zakończona w ciągu 20 minut.
-Wysoka wydajność RNA: Kolumna zawierająca tylko RNA i unikalna formuła mogą skutecznie oczyszczać RNA.
-Bezpieczny — nie stosuje się żadnych odczynników organicznych.
-Duża zdolność przetwarzania próbek — za każdym razem można przetwarzać do 200 μl próbek.
-Wysoka jakość — oczyszczony RNA jest bardzo czysty, wolny od białek i innych zanieczyszczeń i może spełniać różne dalsze zastosowania eksperymentalne.
Parametry zestawu
Zastosowanie zestawu:
Nadaje się do ekstrakcji i oczyszczania całkowitego RNA z pełnej krwi ssaków.
Przepływ pracy
Warunki przechowywania
Bufor RCL (10×) należy przechowywać w temperaturze 2-8 ℃;pozostałe elementy zestawu mogą być przechowywane w temperaturze pokojowej (15-25 ℃) w suchych warunkach i mogą być przechowywane przez 12 miesięcy.Bufor BRL1 można przechowywać w temperaturze 4°C przez 1 miesiąc po dodaniu β-merkaptoetanolu (opcjonalnie).
Uwaga: W przypadku przechowywania w niskiej temperaturze roztwór jest podatny na wytrącanie.Pamiętaj, aby umieścić roztwór w zestawie w temperaturze pokojowej na pewien czas przed użyciem.W razie potrzeby podgrzać go w łaźni wodnej o temperaturze 37°C przez 10 minut w celu rozpuszczenia osadu i dobrze wymieszać przed użyciem.
Przewodniki do analizy problemów
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail:Tech@foregene.com。
Nie można wyekstrahować żadnego RNA lub wydajność kwasu nukleinowego jest niska
Zwykle istnieje wiele czynników, które wpływają na skuteczność odzyskiwania, takich jak: zawartość RNA w próbce, metoda działania, objętość elucji itp..
Analiza typowych przyczyn:
1. Kąpiel lodowa lub wirowanie w niskiej temperaturze (4°C) podczas pracy.
Sugestia: praca w temperaturze pokojowej (15-25°C), nigdy kąpiel lodowa i wirówka niskotemperaturowa.
2. Niewłaściwe przechowywanie próbek lub zbyt długie przechowywanie próbek.
Sugestia: Przechowuj próbki w temperaturze -80 ° C lub zamrażaj w ciekłym azocie i unikaj wielokrotnego zamrażania i rozmrażania;spróbuj użyć świeżo pobranych próbek do ekstrakcji RNA.
3. Niewystarczająca liza próbki
Zalecenie: Należy upewnić się, że próbka i roztwór roboczy (Linear Acrylamide) zostały dokładnie wymieszane i inkubowane przez 10 min w temperaturze pokojowej (15-25°C)
4. Eluent został dodany nieprawidłowo
Zalecenie: Upewnij się, że ddH2O wolna od RNaz została dodana na środek membrany kolumny oczyszczającej
5. Niewłaściwa ilość bezwodnego etanolu w buforze Buffer viRW2
Sugestia: Postępuj zgodnie z instrukcjami, dodaj odpowiednią objętość bezwodnego etanolu do Buffer viRW2 i dobrze wymieszaj przed użyciem zestawu.
6. Niewłaściwe użycie próbki.
Sugestia: 200 µl próbki na 500 µl Buffer viRL.Nadmierna objętość próbki spowoduje zmniejszenie szybkości ekstrakcji RNA.
7. Niewłaściwa objętość elucji lub niepełna elucja.
Sugestia: Objętość eluentu kolumny oczyszczającej wynosi 30-50 μl;jeśli efekt elucji nie jest zadowalający, zaleca się dodanie podgrzanego ddH wolnego od RNaz2O i wydłużyć czas umieszczania w temperaturze pokojowej, np. 5-10 min
8. Kolumna oczyszczająca zawiera pozostałości etanolu po przepłukaniu w Buffer viRW2.
Sugestia: Jeśli po przepłukaniu w Buffer viRW2 i pustym wirowaniu przez 2 minuty nadal pozostaje etanol, kolumnę oczyszczającą można pozostawić w temperaturze pokojowej na 5 minut po odwirowaniu w pustej probówce, aby całkowicie usunąć pozostały etanol.
Degradacja oczyszczonych cząsteczek RNA
Jakość oczyszczonego RNA jest związana z takimi czynnikami jak przechowywanie próbki, zanieczyszczenie RNazą i działanie.
Analiza typowych przyczyn:
1. Pobrane próbki nie zostały zapisane na czas.
Sugestia: Jeśli próbka nie zostanie wykorzystana w czasie po pobraniu, należy ją natychmiast przechowywać w temperaturze -80 ℃ lub w ciekłym azocie.Do ekstrakcji cząsteczek RNA staraj się używać świeżo pobranych próbek, gdy tylko jest to możliwe.
2. Pobrane próbki wielokrotnie zamrażano i rozmrażano.
Sugestia: Unikaj wielokrotnego zamrażania i rozmrażania (nie więcej niż jeden raz) podczas pobierania i przechowywania próbek, w przeciwnym razie wydajność kwasu nukleinowego spadnie.
3. Na sali operacyjnej wprowadzono RNazę lub nie założono rękawiczek jednorazowych, maseczek itp.
Sugestia: Eksperyment z ekstrakcją cząsteczek RNA najlepiej przeprowadzać w oddzielnym pomieszczeniu operacyjnym RNA, a stół doświadczalny jest czyszczony przed eksperymentem.Podczas eksperymentu należy nosić jednorazowe rękawiczki i maski, aby uniknąć degradacji RNA spowodowanej wprowadzeniem RNazy.
4. Odczynnik jest zanieczyszczony RNazą podczas użytkowania.
Sugestia: Wymień na nowy zestaw do izolacji wirusowego RNA dla powiązanych eksperymentów.
5. Zanieczyszczenie RNazami probówek wirówkowych, końcówek pipet itp. Sugestia: Upewnij się, że probówki wirówkowe, końcówki pipet i pipety są wolne od RNaz.
Oczyszczone cząsteczki RNA wpłynęły na późniejsze eksperymenty
Cząsteczki RNA oczyszczone przez kolumnę oczyszczającą wpłyną na dalsze eksperymenty, jeśli będzie zbyt dużo jonów soli lub białek, takich jak: odwrotna transkrypcja, Northern Blot itp..
1. W eluowanych cząsteczkach RNA znajdują się pozostałe jony soli.
Zalecenie: Upewnij się, że do buforu Buffer viRW2 dodano odpowiednią objętość bezwodnego etanolu i dwukrotnie przemyj kolumnę oczyszczającą zgodnie z prawidłową prędkością wirowania podaną w instrukcji obsługi. Jeśli nadal pozostają jony soli, możesz dodać bufor viRW2 do kolumny oczyszczającej i pozostawić ją w temperaturze pokojowej na 5 minut.Następnie wykonaj wirowanie, aby w jak największym stopniu usunąć zanieczyszczenia jonami soli
2. W eluowanych cząsteczkach RNA znajduje się pozostały etanol
Sugestia: po potwierdzeniu, że kolumny oczyszczające zostały przepłukane Buffer viRW2, należy wykonać wirowanie w pustej probówce zgodnie z prędkością wirowania podaną w instrukcji obsługi.Jeśli nadal pozostaje etanol, można go pozostawić na 5 minut w temperaturze pokojowej po odwirowaniu z pustą probówką, aby w największym stopniu usunąć pozostały etanol.
Podręczniki:
Instrukcja obsługi zestawu do izolacji wirusowego RNA