Istnieją dwa główne rodzaje zagrożeń w laboratoriach PCR: ryzyko związane z bezpieczeństwem biologicznym i ryzyko zanieczyszczenia kwasem nukleinowym.Ta pierwsza szkodzi ludziom i środowisku, druga wpływa na wyniki testów PCR.Ten artykuł dotyczy punktów monitorowania ryzyka w laboratorium PCR i odpowiadających im poziomów ryzyka.

01 Oddział laboratorium PCR

1. Laboratorium badawcze biologii molekularnej

Zgodnie z wymaganiami art. 1.1 Podstawowych standardów ustalania dla laboratoriów klinicznych badań amplifikacji genów laboratoria PCR składają się zasadniczo z czterech obszarów: obszaru przechowywania i przygotowywania odczynników, obszaru przygotowywania próbek, obszaru amplifikacji i obszaru analizy produktów amplifikacji.Jeśli stosowana jest metoda fluorescencyjnej reakcji PCR w czasie rzeczywistym, obszar amplifikacji i obszar analizy można połączyć w jeden obszar;jeśli używany jest w pełni zautomatyzowany analizator PCR, obszar przygotowania próbki, obszar amplifikacji i obszar analizy można połączyć w jeden obszar.

„Workbook for New Coronavirus Nucleic Acid Testing in Medical Institutions (Trial Version 2)” stanowi, że co do zasady laboratoria przeprowadzające badania kwasów nukleinowych nowego koronawirusa powinny wyznaczyć następujące obszary: obszar przechowywania i przygotowania odczynników, obszar przygotowania próbek, obszar amplifikacji i analizy produktów.Te trzy obszary powinny być całkowicie niezależne od siebie w przestrzeni fizycznej i nie może być bezpośredniej komunikacji z powietrzem.

2. Pomieszczenie przygotowania próbek

Chociaż próbki można łatwo przygotować w obszarze przygotowywania próbek, w przypadku złożonych próbek i dużej liczby próbek nadal wymagane jest specjalne pomieszczenie do przygotowywania próbek.Pomieszczenie przygotowania próbek obarczone jest wysokim ryzykiem bezpieczeństwa biologicznego i zanieczyszczenia kwasami nukleinowymi.

3. Pomieszczenie unieszkodliwiania odpadów

Niewłaściwe przetwarzanie odpadów spowoduje również ogromne ryzyko związane z bezpieczeństwem biologicznym i skażeniem kwasami nukleinowymi w laboratorium.Dlatego pomieszczenie do przetwarzania odpadów musi być regularnie monitorowane.

02 Punkty monitorowania ryzyka w laboratoriach PCR

Oddzielne laboratoria są podzielone na pomieszczenie przygotowania próbek, pomieszczenie przechowywania i przygotowania odczynników, pomieszczenie przygotowania próbek, pomieszczenie amplifikacji i analizy produktów oraz pomieszczenie unieszkodliwiania odpadów.

W zależności od rodzaju miejsca pobierania próbek dzieli się je na powierzchnię, instrument, próbkę, monitorowanie środowiska i pipetę.

Poziom ryzyka waha się od niskiego do wysokiego, od jednej gwiazdki★ do trzech gwiazdek★★★.

1. Pomieszczenie przygotowania próbek:

Służy do rejestracji, przygotowania i inaktywacji próbek, a zagrożenie bezpieczeństwa biologicznego jest najwyższe.Ponieważ próbki nie są ekstrahowane i amplifikowane, z wyjątkiem pipet, które często wchodzą w kontakt z próbkami, ryzyko zanieczyszczenia kwasami nukleinowymi innych części jest niskie.

1-4 Pobieranie próbek w punktach monitoringu

5-8 Pobieranie próbek w punkcie monitoringu

9-12 pobieranie próbek z punktu monitorowania

1. Miejsce przechowywania i przygotowywania odczynników:

Służy do przygotowywania odczynników do przechowywania, dozowania odczynników i przygotowywania mieszaniny reakcyjnej do amplifikacji, a także do przechowywania i przygotowywania materiałów eksploatacyjnych, takich jak probówki wirówkowe i końcówki do pipet.W tym obszarze nie ma bezpośredniego kontaktu z próbkami ani dodatniego kwasu nukleinowego, więc ryzyko związane z bezpieczeństwem biologicznym i zanieczyszczeniem kwasami nukleinowymi jest niskie.

13-16 Pobieranie próbek w punktach monitoringu

17-22 Pobieranie próbek podczas monitorowania
3. Punkty przygotowania próbki

Służy do otwierania cylindra transferowego, inaktywacji próbki (jeśli dotyczy), ekstrakcji kwasu nukleinowego i dodawania go do probówki do reakcji amplifikacji itp. Obszar ten może obejmować przetwarzanie i otwieranie próbek, ryzyko bezpieczeństwa biologicznego jest wysokie, przeprowadza się ekstrakcję kwasu nukleinowego, a ryzyko zanieczyszczenia kwasem nukleinowym jest średnie do wysokiego.

29 Pobieranie próbek w punktach monitoringu

4. Obszar amplifikacji i analizy produktu:

Stosowany do amplifikacji kwasu nukleinowego.Strefa ta nie obejmuje przetwarzania próbek, a zagrożenie bezpieczeństwa biologicznego jest niskie.Amplifikacja kwasu nukleinowego zachodzi głównie w tej strefie, a ryzyko zanieczyszczenia kwasem nukleinowym jest największe.

38 Pobieranie próbek w punktach monitoringu
5. Pomieszczenie unieszkodliwiania odpadów:

Stosowany do wysokociśnieniowej obróbki próbek.Zagrożenia biologiczne związane z przetwarzaniem próbek w tym obszarze są stosunkowo wysokie.Produkty amplifikacji kwasów nukleinowych zaleca się traktować jako odpady medyczne.Wysokie ciśnienie nie jest zalecane, a ryzyko zanieczyszczenia kwasem nukleinowym jest niskie.

43-44 Pobieranie próbek w punktach monitoringu

03 Osprzęt

Tym razem wymieniliśmy 44 punkty monitoringu.Szacuje się, że wiele osób musi zadać sobie pytanie, czy muszą zrobić tyle punktów?Tak, zrób to wszystko!Sugeruję, aby najpierw przeprowadzić ocenę ryzyka we własnym laboratorium, którą można przeprowadzić zgodnie z ryzykiem od wysokiego do niskiego, można również wspólnie monitorować ten sam rodzaj próbek lub opracować plan pobierania próbek do regularnego monitorowania.Krótko mówiąc, każde laboratorium może opracować własny plan wdrożenia w oparciu o własną sytuację.Największym ryzykiem dla laboratoriów badawczych jest ignorowanie ryzyka.