Wstęp:

RNA, nazwa naukowa kwas rybonukleinowy, jego skrót pochodzi od kwasu rybonukleinowego, jest rodzajem kwasu nukleinowego powstającego w wyniku połączenia co najmniej kilkudziesięciu rybonukleotydów wiązaniami fosfodiestrowymi.

Założeniem badania RNA jest ekstrakcja całkowitego RNA wolnego od zanieczyszczeń, a podstawową zasadę ekstrakcji RNA można z grubsza podsumować w następujący sposób:

1. Najpierw rozbij komórki

2. Następnie usuń zanieczyszczenia wielkocząsteczkowe (białka, lipidy, DNA itp.)

3. Wreszcie RNA jest wytrącane podczas usuwania soli i rozpuszczalników organicznych oraz dalszego oczyszczania RNA

Przeszłość i teraźniejszość metody ekstrakcji

Pierwszą generacją metody ekstrakcji RNA jest metoda precypitacji TRIzolem (wykorzystywane odczynniki to izotiocyjanian guanidyny, fenol, chloroform itp.) wynaleziona przez dziadka Piotra Chomczyńskiego i babcię Nicolettę Sacchi, ponieważ ten wynalazek umożliwia szybką i łatwą ekstrakcję RNA, od tego czasu rozpoczął się gwałtowny wzrost badań nad RNA.

Później dziadek sprzedał ten patent firmie Invitrogen, a firma Invitrogen wypromowała tę metodę na świecie i stała się metodą szeroko stosowaną.

Później firma Invitrogen została przejęta przez firmę Thermo!

Reprezentatywny produkt: odczynnik TRIzol firmy Invitrogen

Jednak metoda wytrącania TRIzolem wymaga wielokrotnego wytrącania i ekstrakcji RNA, a stosowane odczynniki są toksyczne i wymagają długiego czasu działania.

Dlatego powstała metoda oczyszczania kolumnowo-enzymatycznego drugiej generacji, wykorzystująca membranę z żelu krzemionkowego jako specyficzny materiał adsorpcyjny kwasu nukleinowego, aby zmaksymalizować odzysk RNA w próbce przy jednoczesnym usunięciu innych zanieczyszczeń.

Metoda drugiej generacji upraszcza działanie w oparciu o stabilną wydajność, zmniejsza czynnik ryzyka i poprawia efektywność ekstrakcji RNA.

Reprezentatywne produkty: QIAGEN RNeasy i większość produktów krajowych

Jednak zarówno metody pierwszej, jak i drugiej generacji wymagają użycia DNazy do usunięcia zanieczyszczeń DNA, co powoduje pewne niedogodności w późniejszych eksperymentach.Resztkowa DNaza zmniejszy wydajność odwrotnej transkrypcji i zmniejszy syntezę pierwszej nici cDNA, wpływając w ten sposób na dokładność wyników.

Dlatego metoda ekstrakcji trzeciej generacji jest optymalizowana na podstawie metody drugiej generacji.Eksperyment nie wymaga dodawania żadnych enzymów, a RNA można łatwo uzyskać za pomocą zaledwie dwóch kolumn.

Kolumna 1: Kolumna czyszcząca DNA do czyszczenia DNA

Kolumna 2: Kolumna zawierająca wyłącznie RNA specyficznie adsorbuje i odzyskuje RNA

Tak prosta operacja nie tylko oszczędza czas, ale także ułatwia obsługę dalszych eksperymentów!

Reprezentatywne produkty: QIAGEN RNeasy Plus iForegeneProdukty z serii oczyszczania RNA

（RNeasy Plus）

（Foregene'aZestaw do izolacji całkowitego RNA roślin)

Powiedz cicho!Zestaw RNA firmy Foregene zawiera również super łatwą w użyciu RNazę Eraser, która może całkowicie usunąć 400 μg RNazy z powierzchni stałej w ciągu 1 minuty, bez wprowadzania żadnych toksycznych substancji do ludzkiego organizmu!

Fotka1: Tabela porównawcza procesów operacyjnych

Produkty Foregene mogą zakończyć ekstrakcję RNA w ciągu zaledwie dwóch piosenek, nie wzbudzaj zazdrości innych o postępy w eksperymencie!

Fotka2:Ewyniki eksperymentalne wykres porównania

Pierwsza generacja (1: TRIzol)

Druga generacja (2: RNeasy firmy QIAGEN)

Trzecia generacja (3: RNeasy plus firmy QIAGEN, 4: Foregene)

Fotka3: Wykres qPCR (wykres krzywej amplifikacji)

Pierwsza generacja (zielony oznacza TRIzol -, czerwony oznacza TRIzol +)

Druga generacja (błękitny oznacza QIAGEN RNeasy-, czerwony oznacza QIAGEN RNeasy +)

Trzecia generacja (niebieski oznacza QIAGEN RNeasy plus, zielony oznacza Foregene)

(Uwaga: wykres qPCR „-” wskazuje, że nie dodano DNazy i nie usunięto zanieczyszczenia DNA. W związku z tym CT jest wyższy, a wynik nie jest dokładny; „+” wskazuje, że dodano DNazę i usunięto zanieczyszczenie DNA, wynik jest dokładny)

Każde ulepszenie techniczne oznacza, że ​​działanie eksperymentu rozwija się w prostszym i bardziej przyjaznym dla użytkownika kierunku.

Foregene ma na celu pomóc większej liczbie naukowców zaoszczędzić czas i koszty eksperymentów, uzyskać wysokiej jakości wyniki eksperymentów i wspólnie tworzyć bardziej wartościowe osiągnięcia w zakresie badań naukowych.