Viral DNA&RNA Isolation Kit Zestawy do ekstrakcji wirusowego DNA i RNA do oczyszczania
Specyfikacje
50 przygotowań, 200 przygotowań
Viral RNA Nucleic Acid Purification Extraction Isolation Kit wykorzystuje kolumnę wirową i formułę opracowaną przez Foregene, która może skutecznie ekstrahować wirusowe RNA o wysokiej czystości i wysokiej jakości z próbek, takich jak osocze, surowica, wolny od komórek płyn ustrojowy i supernatant hodowli komórkowej.Zestaw zawiera w szczególności liniowy akrylamid, który z łatwością wychwytuje niewielkie ilości RNA z próbek.Kolumna tylko z RNA może skutecznie wiązać RNA.Zestaw może przetwarzać dużą liczbę próbek w tym samym czasie.
Cały zestaw nie zawiera RNazy, dzięki czemu oczyszczone RNA nie ulegnie degradacji.Buffer viRW1 i Buffer viRW2 mogą zapewnić, że otrzymany wirusowy kwas nukleinowy jest wolny od białka, nukleazy lub innych zanieczyszczeń, które mogą być bezpośrednio wykorzystane do późniejszych eksperymentów biologii molekularnej.
Elementy zestawu
| Liniowy akrylamid |
| Bufor DRL |
| Bufor RW1, Bufor RW2 |
| ddH wolne od RNaz2O |
| Kolumna DNA/RNA |
| Instrukcje |
Funkcje i zalety
■ Praca w temperaturze pokojowej (15-25℃) przez cały proces, bez kąpieli lodowej i wirowania w niskiej temperaturze.
■ Kompletny zestaw nie zawiera RNaz, nie trzeba się martwić o degradację RNA.
■ Wysoka wydajność kwasu nukleinowego: Kolumna zawierająca tylko DNA/RNA i unikalna formuła mogą skutecznie oczyszczać DNA i RNA.
■ Duża zdolność przetwarzania próbek: każdorazowo można przetwarzać do 200 μl próbek.
■ Duża prędkość: łatwy w obsłudze i można go ukończyć w ciągu 20 minut.
■ Bezpieczeństwo: nie jest wymagany żaden odczynnik organiczny.
■ Wysoka jakość: Oczyszczone fragmenty RNA charakteryzują się wysoką czystością, są wolne od białek i innych zanieczyszczeń i mogą znaleźć zastosowanie w różnych dalszych zastosowaniach eksperymentalnych.
Aplikacja zestawu
Nadaje się do ekstrakcji i oczyszczania wirusowego kwasu nukleinowego w próbkach, takich jak osocze, surowica, wolny od komórek płyn ustrojowy i supernatant hodowli komórkowej.
Przepływ pracy
Diagram
Przechowywanie i trwałość
■ Ten zestaw można przechowywać przez 24 miesiące w suchych warunkach w temperaturze pokojowej (15-25℃);jeśli musi być przechowywany przez dłuższy czas, można go przechowywać w temperaturze 2–8 ℃.
■ Liniowy roztwór akryloamidu można przechowywać w temperaturze pokojowej przez 7 dni;po otrzymaniu zestawu należy go wyjąć i przechowywać w temperaturze -20°C.
■ Po dodaniu Linear Acrylamide do buforu DRL można go przechowywać w temperaturze 2–8°C do 48 godzin.Skorzystaj z gotowego rozwiązania.
Przewodnik po analizie problemu
Poniżej znajduje się analiza problemów, które mogą wystąpić podczas ekstrakcji wirusowego DNA/RNA, mając nadzieję, że będzie pomocna w twoich eksperymentach.Ponadto, w przypadku innych eksperymentalnych lub technicznych problemów innych niż instrukcje obsługi i analiza problemów, oferujemy pomoc techniczną.Jeśli masz jakiekolwiek potrzeby, skontaktuj się z nami: 028-83360257 lub e-mail:
Tech@foregene.com.
Brak ekstrakcji kwasu nukleinowego lub niska wydajność kwasu nukleinowego
Zwykle na skuteczność odzysku wpływa wiele czynników, takich jak: zawartość kwasu nukleinowego w próbce, sposób działania, objętość elucji itp.
Analiza najczęstszych przyczyn:
1. Podczas zabiegu wykonywano kąpiel lodową lub wirowanie w niskiej temperaturze (4°C).
Sugestia: Pracować w temperaturze pokojowej (15-25°C) przez cały proces, nie stosować kąpieli lodowej i wirowania w niskiej temperaturze.
2. Próbka była niewłaściwie przechowywana lub była przechowywana zbyt długo.
Zalecenie: Przechowywać próbki w temperaturze -80°C i unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania;spróbuj użyć świeżo pobranych próbek do ekstrakcji kwasu nukleinowego.
3. Niewystarczająca liza próbki.
Zalecenie: Należy upewnić się, że próbka i roztwór roboczy do lizy zostały dokładnie wymieszane i inkubowane w temperaturze pokojowej (15-25°C) przez 10 minut.
4. Nieprawidłowe dodanie eluentu.
Sugestia: Upewnij się, że ddH2O wolna od RNaz jest dodawana kroplami na środek membrany kolumny oczyszczającej i nie upuszczaj jej na pierścień kolumny oczyszczającej.
5. Do buforu Buffer RW2 nie dodano właściwej objętości etanolu absolutnego.
Sugestia: Postępuj zgodnie z instrukcjami, dodaj odpowiednią objętość etanolu absolutnego do Buffer RW2 i dobrze wymieszaj przed użyciem zestawu.
6. Niewłaściwa objętość próbki.
Sugestia: 200 µl próbki jest przetwarzane na każde 500 µl buforu DRL.Nadmierne przetwarzanie próbki spowoduje niższą wydajność ekstrakcji kwasu nukleinowego.
7. Niewłaściwa objętość elucji lub niepełna elucja.
Zalecenie: Objętość eluentu kolumny oczyszczającej wynosi 30-50 μl;jeśli efekt elucji nie jest zadowalający, zaleca się wydłużenie czasu w temperaturze pokojowej po dodaniu podgrzanej ddH2O wolnej od RNaz, np. 5-10 min.
8. Etanol pozostaje na kolumnie po przemyciu buforem Buffer RW2.
Sugestia: Jeśli po wirowaniu z buforem Buffer RW2 przez 2 minuty pozostaje etanol, kolumnę można umieścić w temperaturze pokojowej na 5 minut po wirowaniu, aby całkowicie usunąć pozostałości etanolu.
Oczyszczony kwas nukleinowy ulega degradacji
Jakość oczyszczonego kwasu nukleinowego jest związana z konserwacją próbki, zanieczyszczeniem RNazą, działaniem i innymi czynnikami.Analiza najczęstszych przyczyn:
1. Pobranych próbek nie przechowywano w czasie.
Sugestia: Jeśli próbka nie zostanie wykorzystana w czasie po pobraniu, należy ją natychmiast przechowywać w temperaturze -80°C w niskiej temperaturze.Do ekstrakcji RNA spróbuj użyć świeżo pobranych próbek.
2. Zbierz próbki i wielokrotnie zamrażaj i rozmrażaj.
Sugestia: Unikaj zamrażania i rozmrażania (nie więcej niż jeden raz) podczas pobierania i przechowywania próbek, w przeciwnym razie wydajność kwasu nukleinowego zostanie zmniejszona.
3. RNaza jest wprowadzana na salę operacyjną lub nie są noszone rękawiczki jednorazowe, maseczki itp.
Zalecenie: Eksperymenty z ekstrakcją RNA najlepiej przeprowadzać w oddzielnej sali operacyjnej RNA, a stół laboratoryjny powinien być wyczyszczony przed eksperymentem.
Podczas eksperymentu należy nosić jednorazowe rękawiczki i maski, aby w największym stopniu uniknąć degradacji RNA spowodowanej wprowadzeniem RNazy.
4. Podczas stosowania odczynnik został zanieczyszczony RNazą.
Zalecenie: Wymień na nowy zestaw do izolacji wirusowego DNA/RNA do podobnych eksperymentów.
5. Probówki wirówkowe i końcówki pipet używane do manipulacji RNA są zanieczyszczone RNazą.
Sugestia: Upewnij się, że probówki wirówkowe, końcówki do pipet, pipety itp. używane do ekstrakcji RNA są wolne od RNaz.
Oczyszczony kwas nukleinowy wpływa na późniejsze eksperymenty
DNA i RNA oczyszczone przez kolumnę oczyszczającą, jeśli zawartość jonów soli i białek jest zbyt wysoka, wpłynie to na dalsze eksperymenty, takie jak: amplifikacja PCR, odwrotna transkrypcja itp.
1. Eluowane DNA i RNA zawierają resztkowe jony soli.
Sugestia: Upewnij się, że do buforu Buffer RW2 dodano odpowiednią objętość etanolu absolutnego i dwukrotnie przemyj kolumnę oczyszczającą z prędkością wirowania określoną w instrukcji obsługi;Wykonaj wirowanie, aby zminimalizować zanieczyszczenie jonami soli.
2. Eluowane DNA i RNA zawierają reszty etanolowe.
Sugestia: Po potwierdzeniu przemycia buforem Buffer RW2 wykonaj wirowanie pustych probówek z prędkością wirowania podaną w instrukcji obsługi;jeśli nadal znajdują się pozostałości etanolu, można odwirować pustą probówkę, a następnie umieścić ją w temperaturze pokojowej na 5 minut, aby usunąć jak najwięcej pozostałości etanolu.
Podręczniki:
Instrukcja obsługi zestawu do izolacji wirusowego DNA i RNA
